做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是()

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培养基的概念、种类及营养构成： 
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 
（2）种类：固体培养基和液体培养基。 
（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 
（4）培养基配制时的注意事项： ①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染。 ②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。 ③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 ④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。培养基不一定都含有碳源、氮源等物质，如培养自养型微生物的培养基中不需要加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中不需要加入氮源，A错误；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落，以防将菌种烫死，C错误；进行系列稀释操作时,用移液管吸取相应的菌液注入试管后,还要用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀，D正确。故选D。

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