A、需要用限制酶对运载体与含有人类胰岛素基因的DNA分子进行切割,并用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA分子,A正确;
B、将目的基因导入受体细菌时,需要感受态细胞法,即用CaCl2处理细菌细胞使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,B正确;
C、重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录,这样才能合成人类胰岛素,C正确;
D、通常通过检测目的基因产物来检验重组DNA是否表达,D错误.
故选:D.
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