用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )

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试题平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌，都用相同的固体培养基，A错误；平板划线法需用接种环；稀释涂布平板法需用接种钩，B错误；只有稀释涂布平板法可以用来计数活菌，C错误；为了防止杂菌感染，平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌都需要在火焰旁迸行接种，D正确。方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 
（1）接种环的灼烧：①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物；②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端；③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。
（2）灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。
（3）划线时最后一区域不要与第一区域相连。
（4）划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。 
（1）稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm 处
（2）涂布平板时：①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。 目的 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落 培养 平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染

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