A、RNA分子可作为DNA合成的模板，如逆转录中，A正确；
B、真核细胞内的mRNA和tRNA都在细胞核中合成，B错误；
C、密码子是指mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻的碱基，共64种，C正确；
D、细胞中组成蛋白质的氨基酸有20种，tRNA有61种，且具有专一性，即一种tRNA只能转运一种氨基酸，一种氨基酸可由一种或多种tRNA转运，D正确．
故选：B．
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