血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;
再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;
然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;
最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。
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