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PCR技术是一种DNA扩增技术,所需的酶来自于


A.酵母菌
B.大肠杆菌
C.Taq细菌
D.病毒

所属分类: 生物 (免费栏目) 浏览量: 82 次


Taq酶

Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus ( Taq )中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。一般常用的Taq酶可以分为rTaq酶和LTaq酶两类,LTaq酶的保真性更强,耐热性也比rTaq酶好。
对于PCR的应用有里程碑的意义,PCR循环包括变性(90 °C左右)、退火(50°C左右)、延伸(70°C左右),每一步对温度的要求都不一样,多数酶在高温时即变性失活,然而该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,所以不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷。同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
在应用Taq DNA聚合酶进行PCR反应时,变性往往在94~95°C条件下进行,这也是Taq DNA 聚合酶进行30个或者30个以上PCR循环而活力不受到过多损失时所能耐受的最高温度。然而这种酶的保真度不高,因为这种酶的DNA聚合作用依赖于3'-5’校正。
Taq酶在不同温度下的活性
与一般酶不同,用Taq酶扩增DNA时常使片段3'端凸出一个A,应注意.这是因为TaqDNA聚合酶具有一种模板依赖的末端转移酶活性(延伸活性),导致扩增DNA片段在3'末端附加单个的未配对的核苷酸。

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