A、将目的基因从外源DNA上切割出来,A错误;
B、限制酶能识别并切割特定的DNA核苷酸序列,形成黏性末端和平末端,B正确;
C、DNA连接酶将目的基因与运载体结合,即连接的是连个核苷酸之间的磷酸二酯键,C错误;
D、运载体将目的基因导入受体细胞,D错误.
故选:B.
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