A、将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法,A正确;
B、稀释涂布平板法接种可以形成单菌落,所以常用来进行微生物的计数,平板划线法常用来筛选分离微生物,B错误;
C、两种接种方法在培养基中形成单个菌落,C正确;
D、为防止杂菌污染.接种工具需要灭菌后使用,D正确;
故选:B.
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