近20年来,在细胞融合和染色体技术的基础上建立了一种“早熟染色体凝集”技术。研究发现,处于细胞分裂期的细胞内含有的促进染色质凝集的物质——有丝分裂因子,能诱导分裂间期的细胞染色质提前凝集成染色体。利用这一技术,可以在光学显微镜下直接观察间期细胞中染色质结构的动态变化。下列说法正确的是①该实验需要通过细胞培养获得细胞分裂期和分裂间期的细胞②培养动物细胞时,培养液中需加入动物血清③收集动物细胞时,需要采用胰蛋白酶溶液处理④培养分裂期细胞的培养液中需加入一定浓度的秋水仙素

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MPF即卵细胞促进成熟因子（maturation-promoting factor），或细胞分裂促进因子。在成熟的卵母细胞、分裂期粘菌、酵母等中可提取到这种促细胞分裂因子。由两个亚基组成，一种是细胞周期蛋白，一个是依赖周期蛋白起作用的蛋白激酶，其中周期蛋白为调节亚基。能够促使染色体凝集，使细胞由G2期进入M期的因子。 在结构上，它是一种复合物，由周期蛋白依赖性蛋白激酶（Cdk）和G2期周期蛋白组成，其中，周期蛋白对蛋白激酶起激活作用，周期蛋白依赖性蛋白激酶是催化亚基, 它能够将磷酸基团从ATP转移到特定底物的丝氨酸和苏氨酸残基上。酵母细胞周期中只有一种Cdk,而哺乳动物的细胞周期中有多种Cdk,所以哺乳动物的MPF是由Cdk1和周期蛋白B组成的复合物。 有丝分裂期细胞与间期细胞融合后，会使间期细胞产生形态各异的染色体凝集，称作早熟染色体凝集。这一现象表明，分裂期细胞中可能存在某种诱导染色体发生凝集的因子。在成熟卵母细胞 分裂期黏菌 酵母等中提取到了这种促细胞分裂因子，称为成熟促进因子（Maturation-promoting factor）。MPF是由催化亚单位和调节亚单位组成。催化亚单位是由cdc2基因编码的一类蛋白质，只有与调节亚单位结合后，才具蛋白激酶活性，促使细胞进入分裂期。调节亚单位是一类随细胞周期变化而周期性出现或消失的蛋白质，称为细胞周期蛋白，它具有细胞周期特异性及细胞类型特异性。 MPF(M期促进因子或细胞促分裂因子或卵细胞促成熟因子)是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶，即CDK1激酶，由p34cdc2蛋白和周期蛋白B结合而成。CDK1激酶活性首先依赖于周期蛋白B含量的积累，随周期蛋白B浓度变化而变化：周期蛋白B一般在G1期的晚期开始合成，通过S期，其含量不断增加，随着周期蛋白B含量达到一定程度，CDK1激酶活性开始出现；到达G2期时周期蛋白B含量达到最大值，G2晚期阶段CDK1激酶活性达到最大值并一直维持到M期的中期阶段。CDK1激酶活性还受到激酶与磷酸酶的调节，活化的CDK1激酶可使更多的CDK1激酶活化。活化的CDK1激酶促使分裂期细胞在分裂前期执行下列生化事件：染色质开始浓缩形成有丝分裂染色体；细胞骨架解聚，有丝分裂纺锤体开始组装；高尔基复合体、内质网等细胞器解体，形成小的膜泡。

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